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芽孢菌的分離培養(yǎng)

2017-04-19  來自: 鶴壁市百惠生物科技有限公司 瀏覽次數(shù):1996

  芽孢菌參與許多有機(jī)物的轉(zhuǎn)化及生物降解,多數(shù)為好氧或兼性厭氧微生物,菌體桿狀或球狀。芽孢是在菌體內(nèi)形成的圓形或橢圓形的內(nèi)生孢子。芽孢的代謝活力弱,對不良環(huán)境如高溫、干燥、化學(xué)藥品等的抵抗力強(qiáng)。
    分離步驟如下:
(1)將水樣接種于刺激芽孢生長的培養(yǎng)基中,35℃培養(yǎng)18~24小時(shí)。將培養(yǎng)好的菌懸液置于80℃水浴中加熱10~20分鐘以殺死不能形成芽孢的菌體。
    刺激芽孢生長的培養(yǎng)基如下:
蛋白胨      10g        KH2PO4   1.5g
酵母膏      3g         Na2HPO4  2 g
淀粉        3g         H2O     1000 ml
MgSO4·7H2O 0.1g       pH7.8
121℃, 15分鐘
(2)將加熱處理過的菌懸液稀釋為10-3、10-4、10-5,分別取0.5mL接入無菌平板,倒入芽孢菌分離培養(yǎng)基,混勻,置于35℃,培養(yǎng)18~24小時(shí)。
    芽孢菌分離培養(yǎng)基如下:
    用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基與70Bx麥芽汁培養(yǎng)基,溶化后以1:1的量混勻即成.
營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配方為:
肉膏      3~5g       NaCl     5 g
蛋白胨    10 g        瓊脂     15~20g
H2O       1000ml      pH       7.0~7.2
121℃,20分鐘
(3)挑取單菌落作分離純化培養(yǎng):
    單菌落→液體培養(yǎng)基→菌懸液→劃線分離,經(jīng)數(shù)次重復(fù),直至由單個(gè)細(xì)胞形成單獨(dú)的菌落。

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